Mô tả sản phẩm
STEM-CELLBANKER® được sử dụng để bảo quản tế bào gốc, tế bào iPS và các tế bào có giá trị khác. Một số dữ liệu gần đây cũng ủng hộ khả năng môi trường này có thể bảo quản lạnh cả các mô. Sản phẩm hoàn toàn không chứa thành phần có nguồn gốc từ huyết thanh và động vật, chỉ chứa các thành phần được phân loại theo USP, EP, JP hoặc tá dược JP. Sản phẩm này được cung cấp dưới dạng sẵn sàng sử dụng cùng hướng dẫn cực kỳ đơn giản.
STEM-CELLBANKER® đạt tiêu chuẩn GMP được sản xuất tại các cơ sở tuân thủ các nguyên tắc GMP của JP, EU, Hoa Kỳ cũng như PIC/S, đồng thời quá trình sản xuất và chất lượng được kiểm soát theo các nguyên tắc của JP GMP.
Một số ưu điểm của sản phẩm:
- Tăng khả năng sống sót của tế bào trong khi vẫn duy trì tính toàn năng của chúng, kiểu nhân bình thường và khả năng tăng sinh sau rã đông không bị ảnh hưởng.
- Phục vụ bảo quản lạnh các mô mà không bị hư hại ở mức DNA/RNA
- Việc bảo quản tế bào trở nên an tâm hơn với các nguyên liệu chất lượng cao, không bị nhiễm các thành phần có nguồn gốc từ động vật, ổn định về chất lượng.
- Tiết kiệm chi phí/thời gian/các bước với công thức hoàn chỉnh, không cần chuẩn bị thêm gì, đông lạnh trực tiếp ở -80 độ C, không cần tủ đông có chức năng lập trình, v.v...
- Sản phẩm chất lượng cao, được giám sát chặt chẽ theo JP GMP
Sản phẩm này đã được đăng ký tại MF trong PMDA vào năm 2013 và tại BBMF trong CBER (Trung tâm Nghiên cứu và Đánh giá Sinh học)/FDA (Cục Quản lý Thực phẩm và Dược phẩm Hoa Kỳ) vào 2013.
Bảo quản ở nhiệt độ 2 - 8 hoặc dưới -20 độ C. Trong điều kiện chưa mở nắp và ở nhiệt độ bảo quản (2-8 độ C), sản phẩm sẽ ổn định trong 3 năm kể từ ngày sản xuất.
Thông số kỹ thuật
Protocol (cho dòng sản phẩm CELLBANKER® )
Làm đông
Để có kết quả tối ưu, các tế bào phải ở giai đoạn tăng trưởng log. Các quy trình làm đông tương tự hay làm đông tiêu chuẩn có thể được thay thế.
- Kiểm tra và đảm bảo tế bào nuoi cấy không bị nhiễm, trong điều kiện phát triển khỏe mạnh, ...
- Đếm tế bào để xác định tỷ lệ sống chết của tế bào
- Nhẹ nhàng ly tâm tế bào (3 - 5 phút, 1,000~2,000rpm, 4℃). Loại bỏ dịch nổi bên trên.
- Nhẹ nhàng hòa tan sinh khối tế bào bằng môi trường bảo quản lạnh CELLBANKER (1 ml cho 5x105 - 5x106 tế bào)
- Phân phối huyền phù tế bào theo mỗi 1 mL vào các lọ bảo quản lạnh đã được dán nhãn tên dòng tế bào, nồng độ tế bào, ngày bảo quản và các thông tin cần thiết khác.
- Bảo quản các lọ tế bào này ở -80℃. Nếu cần, chuyển các lọ đã đông lạnh sang bể chứa ni tơ lỏng sau khi các lọ đã được đông lạnh ít nhất 24 giờ.
Chú ý: việc tối ưu quy trình có thể thay đổi tùy loại tế bào
Rã đông
- Lấy tế bào đông lạnh ra khỏi tủ đông, rã đông nhanh trong bể ổn nhiệt nước, có lắc ở 37°C.
- Pha loãng và đảo trộn nhẹ nhàng mỗi 1 mL tế bào với 10 mL môi trường nuôi cấy tế bào hoàn chỉnh.
- Ly tâm tế bào thật nhẹ nhàng (3-5 phút, 1,000 - 2,000rpm, 4°C). Loại bỏ dịch nổi bên trên.
- Hòa tan sinh khối tế bào với một lượng môi trường nuôi cấy tế bào hoàn chỉnh thích hợp. Sau đó chuyển vào bình nuôi cấy.
- Tiếp tục các quy trình nuôi cấy tiếp theo theo quy trình chuẩn.
Ứng dụng
1. Phân tích kết quả bảo quản lạnh tế bào hESC và iPS bằng môi trường STEM-CELLBANKER®
Các dòng tế bào được thử nghiệm: HS293 & HS306 (hESC); ChiPSA (tế bào iPS của người)
Môi trường bảo quản lạnh: STEM-CELLBANKER® và môi trường bảo quản lạnh thông thường (10% DMSO trong môi trường nuôi cấy thay thế huyết thanh)
Đánh giá khả năng sống sót của tế bào: kiểm tra khả năng sống/chết của tế bào dựa trên trypan Blue & calcein-esterase
Kết quả: khả năng sống sót của tế bào cao hơn đáng kể trong khi tính toàn năng của tế bào, kiểu nhân bình thường và khả năng tăng sinh vẫn được duy trì trên các dòng tế bào HS293, HS306 and ChiPSA cell lines.
2. Phân tích kết quả bảo quản lạnh trên tế bào gốc trung mô (MSC) và tế bào tiền thân nội mô (EPC) bằng STEM-CELLBANKER®.
MSCs EPCs
STEM-CELLBANKER® >95% >90%
Các dòng tế bào đã được thử nghiệm: MSCs and EPCs có nguồn gốc từ UCB của con người
Môi trường bảo quản lạnh: STEM-CELLBANKER®
Quy trình làm đông: trực tiếp làm đông tế bào ở -80℃ trong 3 ngày, sau đó chuyển sang -192℃ trong 72 ngày.
Đánh giá khả năng sống sót của tế bào: phương pháp nhuộm trypan Blue
Kết quả: khả năng sống của tế bào cao hơn 95% với MSCs và 90% với EPCs trong khi khả năng tăng sinh cũng như biệt hóa vẫn được duy trì trong các tế bào được thử nghiệm.
3. Phân tích kết quả bảo quản lạnh trên tế bào ES của chuột (129SV)
Dòng tế bào được thử nghiệm: 129SV (Tế bào ES của chuột)
Môi trường bảo quản lạnh: CELLBANKER 1, 1plus, 2 và STEM-CELLBANKER®
4. Bảo quản lạnh mô thận của chuột bằng STEM-CELLBANKER®
Thận chuột được băm thành hình vuông kích cỡ khoảng 5 mm. Các mẫu mô được cố định ngay lập tức bằng formalin 10% hoặc được bảo quản lạnh bằng 1 ml STEM-CELLBANKER ở -80°C trong 1 tuần. Các mẫu được bảo quản lạnh được cố định bằng forrmalin 10% ngay sau khi rã đông. Các phần paraffin của cả hai mẫu đều được nhuộm bằng kháng thể H&E hoặc kháng thể caspase 3 kháng hoạt tính. Dấu hiệu hoại tử hoặc apoptosis là không đáng kể ở cả mẫu mô tươi và mẫu được bảo quản lạnh. Kết quả tương tự cũng thu được trong trường hợp mẫu mô từ nhiều cơ quan khác nhau của chuột.
5. Bảo quản mRNA sau khi bảo quản lạnh tế bào với STEM-CELLBANKER®
RNA tổng số được chiết xuất từ các tế bào của dòng tế bào nguyên bào sợi phổi chuột ngay sau khi thu hoạch hoặc sau khi bảo quản lạnh bằng STEM-CELLBANKER ở -80°C trong một tuần và rã đông. Lượng mRNA trong 2 mẫu được so sánh thông qua phương pháp DNA microarray, kết quả cho thấy 93% mRNA nằm trong phạm vi chênh lệch + 1,6 lần.
Thông tin đặt hàng
Tài liệu
SDS : STEM-CELLBANKER® GMP grade
Protocol（human ES and iPS cells）
EPCs
MSCs
Ý kiến khách hàng
